Главная » 2014 » Июнь » 19 » Скачать Влияние белка теплового шока 70 КДА и липополисахарида из Rhodobacter capsulatus на физиологические эффекты эндотоксинов. бесплатно
1:27 AM
Скачать Влияние белка теплового шока 70 КДА и липополисахарида из Rhodobacter capsulatus на физиологические эффекты эндотоксинов. бесплатно
Влияние белка теплового шока 70 КДА и липополисахарида из Rhodobacter capsulatus на физиологические эффекты эндотоксинов
Диссертация
Автор: Кустанова, Гульсара Амангалиевна
Название: Влияние белка теплового шока 70 КДА и липополисахарида из Rhodobacter capsulatus на физиологические эффекты эндотоксинов
Справка: Кустанова, Гульсара Амангалиевна. Влияние белка теплового шока 70 КДА и липополисахарида из Rhodobacter capsulatus на физиологические эффекты эндотоксинов : диссертация кандидата биологических наук : 03.00.13 Пущино, 2007 117 c. : 61 07-3/509
Объем: 117 стр.
Информация: Пущино, 2007
Содержание:
Список использованных сокращений
ВВЕДЕНИЕ
Глава I ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
11 Сепсис - общемедицинская проблема
12 Современное состояние проблемы в области изучения эндотоксинового шока
121 Структура бактериальных ЛПС
122 Этиология эндотоксинового шока
123 Рецепторы ЛПС
124 Медиаторы эндотоксинового шока
125 Влияние ЛПС на сердечно-сосудистую систему
126 Влияние ЛПС на систему гемостаза
127 Влияние ЛПС на биохимические параметры крови
13 Белки теплового шока
131 Структура, функции, протективная роль
132 Современное состояние проблемы изучения протективной функции белков теплового шока
133 БТШ и сердечно-сосудистая система
134 БТШ и апоптоз
135 Перспективы использования системы БТШ в медицине
14 Антагонисты бактериальных эндотоксинов и их роль в защите от сепсиса
Глава II МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
II 1 Объект исследования
II2 Методы исследования
П21Катетерная технология регистрации артериального давления и внутривенной инъекции препаратов
1122Хирургические процедуры: имплантация артериальных и венозных катетеров
1123Исследование параметров гемостаза
II24 Биохимические исследования
113 Протоколы исследований
114 Статистическая обработка результатов
Глава III РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
III 1 Влияние экзогенного БТШ70 при его предварительном и последующем введении на физиологические эффекты эндотоксина из Esherichia coli
III 11 Влияние на выживаемость животных
III 12 Влияние на параметры гемостаза
III 13 Влияние на параметры гемодинамики
III 14 Влияние на биохимические параметры
1112 Влияние экзогенного БТШ70 при его предварительном и последующем введении на физиологические эффекты эндотоксина из Salmonella typhimurium
11121 Влияние на выживаемость животных
11122 Влияние на параметры гемостаза
11123 Влияние на параметры гемодинамики
11124 Влияние на биохимические параметры
1113 Превентивные эффекты ЛПС из Rhodobacter capsulatus на физиологические эффекты эндотоксина из Salmonella typhimurium
11131 Влияние на выживаемость животных
11132 Влияние на параметры гемостаза
11133 Влияние на параметры гемодинамики
11134 Влияние на биохимические параметры
Введение:
Актуальность проблемы
В течение длительного времени сепсис остается проблемой медицинского, демографического и экономического значения, поскольку летальность по данным разных авторов может варьировать от 20% до 40%, а в случае развития инфекционно-токсического шока может достигать 80% (Martin et al., 2003; Белобородое, 1997). Согласно недавним литературным данным, в США и в странах Европы сепсис ежегодно развивается у 700000 пациентов, причем количество подтвержденных случаев увеличивается на 1,5 % в год (Angus, Wax, 2001; Riedermann et al., 2003).
Среди причин смертности населения США септицемия, осложненная эндотоксиновым шоком, стоит на 13-ом месте. Особо важное значение приобретают грамотрицательные инфекции в структуре внутрибольничных инфекций у детей и лиц пожилого возраста, а также у пациентов с соматическими заболеваниями. Экстремальные ситуации, стресс, физическое перенапряжение приводят к срыву адаптационных возможностей организма. Эти и другие причины в ослабленном организме приводят к генерализации процесса, крайним проявлением которого является эндотоксиновый шок. Установлено, что у 50% пациентов с сепсисом развивается септический шок, и половина из них погибает, несмотря на адекватное лечение антибиотиками и неотложную терапию (Dal Nogare, 1991).
Эндотоксин грамотрицательных бактерий способен убить человека и животных при очень низкой концентрации в крови - 1 нг/мл (Mayeux, 1997), действуя на разные клетки организма как непосредственно, так и опосредованно, через индукцию синтеза в клетках-мишенях биологически активных веществ. Специфические антитела к эндотоксину применяли в лечении септического шока в двойном слепом исследовании при внутримышечном введении антител новорожденным. Разницы между контрольной и группой новорожденных, получавших антитела, выявлено не было (Румянцев и др., 1988). В связи с изложенным, поиск средств и методов защиты от эндотоксинового шока остается чрезвычайно актуальным.
Исследования действий эндотоксинов нашли отражение в эволюции патогенетической терапии бактериальных инфекций, начиная с применения сорбентов, связывающих эндотоксины, антител к эндотоксинам, ингибиторов синтеза простагландинов и других производных арахидоновой кислоты, блокирования медиаторов воспаления до вмешательства в механизмы нарушения гемостаза (Пак и др., 2003). Однако недавние клинические исследования, направленные на анализ снижения смертности пациентов от сепсиса в зависимости от применяемой терапии, показали практически отсутствие прогресса в лечении этого заболевания (Riedermann et al., 2003).
В последние годы после получения препаратов экзогенного белка теплового шока 70 кДа (БТШ70) - природного и рекомбинантного - возрос интерес к разработке новых лекарственных средств на основе БТШ70 для лечения различных заболеваний. Экспрессия белков теплового шока или стресс-белков является одним из ответов организма на воспаление (Маргулис, Гужова, 2000). В литературе имеются указания на то, что уровни экспрессии БТШ хорошо коррелируют с выживаемостью грызунов в модели эндотоксинового шока (Hotchkiss et al., 1993; Lappas et al., 1994). Эти наблюдения очень важны в клиническом отношении, поскольку могут быть использованы для создания препаратов предотвращающих развитие септического шока при грам-отрицательном сепсисе. В последнее десятилетие большое значение отводится изучению защитных свойств БТШ70. Однако эти исследования проведены в основном на клеточных культурах (Маргулис, Гужова, 2000; Guzhova et al., 1998; Guzhova et al., 2001). На сегодняшний день не вызывает сомнений тот факт, что исследование защитных свойств экзогенного БТШ70 против эндотоксинового шока in vivo представляют собой важный инструмент в оценке ответа целого организма на септическое воздействие и способствует развитию новых подходов к терапии сепсиса.
Еще одним из перспективных направлений в защите от грамотрицательной инфекции становятся природные антагонисты эндотоксинов или аналогичные им вещества, синтезированные химическим путем. В этой связи поиск исходно низкотоксичных липополисахаридов (ЛПС), обладающих свойствами антагонистов эндотоксинов имеет первостепенную значимость (Gangloff et al., 1999). Работы в этом направлении начались в 80-е годы, когда были выделены из фотосинтезирующих бактерий низкотоксичные липополисахариды (Qureshi et al., 1988, Krauss et al., 1989) и в экспериментах in vitro показана их способность конкурировать с эндотоксинами за рецепторы клеток-мишеней (Rietschel et al., 1994). К числу таких низкотоксичных липополисахаридов относится ЛПС из фотосинтезирующей бактерии Rhodobacter capsulatus (Rb. capsulatus). Проведенные ранее исследования на клеточных культурах показали способность защитного действия ЛПС из Rb. capsulatus от некоторых эффектов эндотоксинов (Грачев и др., 1998; Винокуров и др., 2003). Однако, исследования этого препарата in vivo на выявление его защитных свойств, ранее не проводились.
Цель работы
Целью данной работы являлось изучение влияния БТШ70 и ЛПС из Rb. capsulatus на физиологические эффекты эндотоксинов из Esherichia coli (Е. coli) и Salmonella typhimurium (S. typhimurium).
Задачи исследования
1. Исследовать влияние экзогенного БТШ70, в зависимости от способа его применения, на гибель животных, вызванную эндотоксинами из Е. coli и S. typhimurium.
2. Изучить действие экзогенного БТШ70 на вызванные эндотоксинами из Е. coli и S. typhimurium изменения параметров гемостаза.
3. Исследовать влияние экзогенного БТШ70 на вызванные эндотоксинами из Е. coli и S. typhimurium изменения биохимических параметров крови.
4. Изучить влияние ЛПС из Rb. capsulatus на физиологические эффекты эндотоксина из S. typhimurium.
Научная новизна работы
Значительная часть результатов, представленных в данной работе, носит приоритетный характер. Впервые проведено исследование эффектов БТШ70 на животных in vivo. Показано, что БТШ70 при предварительном введении снижает смертность животных от шока, индуцированного разными эндотоксинами, отменяет эндотоксин-индуцибельное увеличение параметров гемостаза. В экспериментах in vivo на крысах впервые проведено исследование защитного действия антагониста эндотоксина низкотоксичного ЛПС из Rb. capsulatus. Показано, что предварительное введение низкотоксичного ЛПС из Rb. capsulatus снижает смертность животных от эндотоксинового шока, снижая его эффекты на организм.
Научно-практическое значение
Полученные результаты показывают, что БТШ70 и ЛПС из Rb. capsulatus могут быть рекомендованы для создания новых фармакологических препаратов для профилактики от эндотоксинов. Создание таких препаратов имеет важное социально-экономическое значение, поскольку они могут быть использованы не только как лечебное средство при эндотоксемии, но и в профилактических целях для предупреждения возникновения подобных осложнений.