Название: Морфогенез лимфоидной ткани кишечника у свиньи
Справка: Козлов, Илья Сергеевич. Морфогенез лимфоидной ткани кишечника у свиньи : диссертация кандидата ветеринарных наук : 16.00.02 / Козлов Илья Сергеевич; [Место защиты: С.-Петерб. гос. акад. вет. медицины] - Киров, 2009 - Количество страниц: 262 с. ил. Киров, 2009 262 c. :
Объем: 262 стр.
Информация: Киров, 2009
Содержание:
ВВЕДЕНИЕ
1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
2 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
21 Материалы и методы
22 Морфология мезентериальных лимфатических узлов в постнатальном онтогенезе свиней породы ландрас
23 Морфология мезентериальных лимфатических узлов в постнатальном онтогенезе свиней породы дюрок
24 Морфогенез кишечно-ассоциированной лимфоидной ткани свиней породы ландрас
25 Морфогенез кишечно-ассоциированной лимфоидной ткани свиней породы дюрок
26 Цитоархитектоника, гистологические, иммуно-гистохимические, ультраструктурные особенности клеток брыжеечных лимфатических узлов в постнатальном онтогенезе свиней
27 Цитоархитектоника, гистологические, иммуно-гистохимические, ультраструктурные особенности клеток одиночных и сгруппированных лимфоидных узелков стенки кишечника в постнатальном онтогенезе свиней
Введение:
Промышленное свиноводство России занимает важное место в снабжении населения высококачественным продуктом питания. В год жители России потребляют около 8 миллионов тонн мяса, в том числе более 2 миллионов тонн свинины. На 1 января 2008 г. численность свиней составляла 16,5 миллионов голов. Помимо государства, серьезную заинтересованность в развитии промышленного свиноводства проявляют частные агропромышленные холдинги.
Одним из немаловажных факторов, влияющими на достижения высокой продуктивности сельскохозяйственных животных в животноводческих хозяйства, является их естественная резистентность. Пероральное поступление генетически чужеродных объектов (бактерий, вирусов) является одной из основных причин возникновения опасных заболеваний. Кишечник является одним из важных иммунокомпетентных органов (Зуфаров К. А. и соавт., 1979), так как поверхность слизистой оболочки пищеварительной трубки является местом активного взаимодействия с самыми различными веществами. Достаточно много научных работ посвящено изучению кишечно-ассоциированной лимфоидной ткани различных видов животных (Гусейнов Т.С., 1987; СапинМ.Р., 1987-2009; Соколов В.И., 1992-2009; Панфилов А.Б., 1991-2009; Видякина М.А., 2003; Сунцова Н.А., 2000-2009 и
Все вышеперечисленные факторы, а также проведение иммунизации животных от инфекционных заболеваний требуют углубленных знаний по становлению и развитию иммунной системы в постнатальном онтогенезе, от состояния которой, в значительной степени, зависит возникновение инфекционного заболевания.
Цель работы: изучить закономерности и особенности развития лимфоцитарного аппарата и кишечно-ассоциированной лимфоидной ткани в постнатальном онтогенезе свиней пород ландрас и дюрок.
Задачи исследования:
1) Изучение и сравнение постнатального морфогенеза мезентериальных лимфатических узлов и кишечно-ассоциированной лимфоидной ткани свиней пород ландрас и дюрок. Выявление характерных особенностей строения на разных этапах индивидуального развития организма.
2) Изучение и сравнение в возрастном аспекте цитоархитектоники, ультраструктуры и гистохимии клеток мезентериальных лимфатических узлов и кишечно-ассоциированной лимфоидной ткани свиньи породы ландрас.
Научная новизна заключается в комплексном подходе к решению поставленных задач, позволяющим более подробно изучить, описать и сравнить возрастные изменения лимфоидной ткани кишечника свиней пород ландрас и дюрок.
Получены новые данные о цитоархитектонике брыжеечных лимфатических узлов, количестве, синтопии и клеточном составе одиночных и сгруппированных лимфоидных узелков в стенках тонкой и толстой кишок. Впервые в онтогенезе получены данные о количестве, синтопии, клеточном составе лимфогландулярных комплексов.
Теоретическая и практическая ценность. Результаты исследований в значительной степени уточняют и дополняют имеющиеся знания о видовой и возрастной морфологии лимфоидной ткани кишечника. Установленные закономерности возрастных изменений и различий лимфоцитарного аппарата и кишечно-ассоциированной лимфоидной ткани позволяют иметь более полное представление о потенциальных возможностях иммунной системы организма. Установленная возрастная динамика изменений топографии и клеточного состава брыжеечных лимфатических узлов и лимфоидных образований стенки кишечника, а также ультраструктурные и гистохимические особенности клеток, позволят клиницистам глубже осмыслить суть происходящих патологических процессов и на этой основе разработать оптимальные сроки вакцинации; методы лечения и профилактики.
Основные положения, выносимые на защиту:
1) Морфология мезентериальных лимфатических узлов свиней пород ландрас и дюрок.
2) Морфология кишечно-ассоциированной лимфоидной ткани стенки кишечника свиней пород ландрас и дюрок.
3) Цитоархитектоника, гистологические, гистохимические, ультраструктурные особенности клеток брыжеечных лимфатических узлов и кишечно-ассоциированной лимфоидной ткани в постнатальном онтогенезе свиней породы ландрас.
Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены на 7-ой научной конференции аспирантов и соискателей «Науке нового века — знания молодых» (Киров, 2007), на пленарном заседании 9-й научной конференции аспирантов и соискателей «Науке нового века - знания молодых» (Киров, 2009).
Публикации. По теме диссертации опубликовано три научных работы, одна работа опубликована в журнале перечня бюллетеня ВАК «Морфологические ведомости».
Внедрение. Результаты научно-исследовательской работы используются в учебном процессе (чтение лекций, проведение лабораторно-практических занятий) и научно-исследовательской работе на морфологических кафедрах Алтайского, Башкирского, Белоцерковского, Казахского, Красноярского, Омского, Саратовского, Ставропольского государственных аграрных университетов; Брянской, Бурятской, Дагестанской, Ивановской, Костромской, Пермской государственных сельскохозяйственных академий; Витебской, Казанской, Санкт-Петербургской государственных академий ветеринарной медицины; Хакасском государственном университете.
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
Лимфоидная система организма возникла эволюционно и онтогенетически для осуществления функции иммунного надзора (Арипов У.А. и соавт., 1984).
Иммунная система такая же самостоятельная система, как, например, пищеварительная, нервная и т.д. (Петров Р.В., 1976). У нее три особенности: она генерализована по всему телу, ее клетки постоянно циркулируют через кровоток, она обладает уникальной особенностью вырабатывать сугубо специфические молекулы антител. Иммунная система контролирует качественное постоянство генетически предетерминированного клеточного и гуморального состава организма (Лебедев К.А. и соавт., 1990).
Лимфоидная система кишечной трубки представлена мезентериальными лимфатическими узлами и лимфоидной тканью, ассоциированной с тканями слизистой оболочки кишечника. Такие образования объединены термином GALT (gut-associated lymphoid tissue) (Быкова В.П., 1995; Хлыстова З.С., 2006).
На основе анализа данных литературы о строении органов иммунной системы, особенностях их развития и преобразования в онтогенезе был выявлен ряд закономерностей. Первая из них состоит в том, что рабочей паренхимой органов иммуногенеза является лимфоидная ткань, вторая - все органы иммунной системы закладываются в раннем эмбриогенезе. (Манухина А.И., 1999).
Первоначально закладываются центральные, а позднее периферические лимфоидные органы иммуногенеза, при этом у высших позвоночных формирование лимфоидной ткани происходит в относительно более ранние этапы онтогенеза, чем у низших — рыб лампретов, амфибий и птиц.
По современным сведениям, формирование иммунной системы человека и млекопитающих начинается с обособления в стенке желточного мешка или вентральной мезодерме стволовых клеток, дающих начало лимфоидной и кроветворной системам. От этих мультипотентных клеток берут начало предшественники всех линий клеток крови. В начале, после появления замкнутого кровообращения, клетки мигрируют в печень - главный гемопоэтический орган плода и тимус - первый лимфоидный орган. Вслед за инфильтрацией тимуса отмечается увеличение количества лимфоцитов в селезенке и лимфатических узлах (Kruml, I. et al., 1970).
Закладка лимфоидных образований происходит под эпителием соответствующих отделов пищеварительной трубки в виде сгущения и уплотнения мезенхимы, из которой затем дифференцируется ретикулярная ткань. Закладывающиеся лимфоидные органы функционируют как ретикулоэпителиальные и ретикулярные, лимфоциты заселяют их не сразу. (Бабаева А.Г., Зотиков Е.А., 1987; Вернет Ф., 1971).
Третья закономерность заключается в том, что к моменту рождения органы иммунной системы достигают достаточной морфологической зрелости. К этому времени они сформированы уже до такой степени, что в состоянии выполнять иммунную защиту организма от генетически чужеродного белка. Во многих периферических иммунных органах новорожденных поросят уже имеются лимфоидные узелки, в том числе, и с центрами размножения (Морозова В. Т., 1997; Чумаков В.Ю., 1999; Панфилов А.Б., 2002).
Наличие таких узелков свидетельствует о полной морфологической и функциональной зрелости лимфоидной ткани в органах иммуногенеза, об их участии в иммунных реакциях организма. Лимфоидные узелки с центрами размножения способны к местному воспроизводству клеток лимфоидного ряда (Сапин М.Р., 1987; Панфилов А.Б., 1990-2002).
Четвертая закономерность развития и преобразования всех органов иммунной системы в онтогенезе состоит в быстром увеличении их размеров у молодняка и в ускоренной дифференцировке лимфоидной ткани (Манухина А.И., 1999).
Лимфоидная ткань, ассоциированная с тканями слизистой оболочки кишечника, представлена либо в виде диффузной инфильтрации, либо в форме узелковых скоплений, лишенных замкнутого соединительнотканного футляра (Сапин М.Р., 1987, Ohtani О. et al., 1991. Boer N. et al., 1992, Kolbjorsen O, et al., 1994; Быкова В.П., 1995; Панфилов А.Б., 1992-2008).
Лимфоциты одиночных и сгруппированных лимфоидных узелков в слизистой и подслизистой оболочках кишечника и мезентериальных лимфатических узлах формируются в условно-функциональные зоны. Sobhon Р. (1971), Abe К. and Ito Т. (1977), Sminia Т. et al. (1982, 1983), Ю.И. Афанасьев и соавт. (1984), Pospischil А. (1989) выделяют 4 зоны: 1) купол; 2) корона; 3) герминативный центр; 4) Т-зона.
Потолокообразное выпячивание лимфоидного узелка (Abe К. And Ito Т. 1977; Torres-Medina А., 1981) называют куполом или верхней зоной (Faulk W.P. et Al.,- 1971). Купол расположен в непосредственной близости к просвету кишечника и отделен от него лишь тонким слоем эпителия, который инфильтрован лимфоидными клетками и макрофагами (Афанасьев Ю.И. и соавт., 1983; Пугач П.В., 1990). Между эпителиоцитами нередко внедрены лимфоциты, плазматические клетки, макрофаги и нейтрофильные гранулоциты, а также большое количество тканевых базофилов (Guy-Grand D. et al., 1974; Jarry A. et al., 1988, 1989). В центре купола располагаются ретикулярные клетки. Митотическая активность клеток здесь очень высокая (Sobhon Р., 1971; Doughri A.M. et al., 1972; Abe К. and Ito. Т., 1977, 1978; Reynolds J.D. et al., 1983; Sminia T. et al., 1982, 1983; Шахламов В.А. и Гайдар Ю.А., 1984). В зоне купола располагаются специализированные М-клетки (клетки Мотта). Они обладают способностью захватывать из просвета кишки, транспортировать в пузырьках через свою цитоплазму и доставлять к подлежащей лимфоидной ткани различные макромолекулы и микроорганизмы. М-клетки происходят от камбиальных клеток кишечных крипт и, созревая, двигаются по направлению к верхушке купола (Мохеу P.S. u. Triers J.S., 1974; Шахламов В.А. и Гайдар Ю.А., 1984; Owen R. L. а.
Nemanic P., 1978; Bye W. A. et. al., 1984; Wolf J. L. a. Bye W., 1984; Egberts HJ.A. et al., 1985; Roy M.J. et al., 1987; Быкова В.П., 1995).
Зона, обозначенная как корона, является непосредственным продолжением купола (Афанасьев Ю.И. и соавт., 1983) и состоит из малых лимфоцитов, окружающих несколькими рядами герминативный центр лимфоидного узелка. Герминативный центр лежит преимущественно в подслизистой основе (Abe К. and Ito Т., 1977) и расположен внутри узелка несколько эксцентрично к мышечной пластинке (Sobhon Р., 1971). Характерной особенностью герминативного центра является почти полное отсутствие бактерий, отсутствие аргирофильных волокон, большое количество лимфобластов и много малых лимфоцитов. Тем не менее, малых лимфоцитов здесь меньше, чем в других областях лимфоидных бляшек, но митотически делящихся клеток больше, чем в других областях (Evans Е.Р. et al., 1967; Doughri A.U. et al., 1972; Карпуть ИМ., 1977; Reynolds J.D. et al., 1983; Inoue T. et al., 1984; Шахламов B.A., Гайдар Ю.Ф., 1984; Юлдашев А.Ю. и соавт., 1986; Mai G. et al., 1988; Пугач П.В., 1990). Т-зоны занимают меньший объем, чем лимфоидные узелки и располагаются под тонкой соединительнотканной перегородкой, отделяющей друг от друга два соседних узелка. Межузелковая (тимусзависимая) зона представлена малыми и средними лимфоцитами, соотношение Т-клеток и В-клеток составляет от 14:1 до 20:1 (Toma V., 1978). Из Т-лимфоцитов в ней преобладают популяции Т-хелперов (Kiyono Н. et. al., 1982). Макрофаги, плазмоциты, клетки с фигурами митозов находятся в межузелковых областях в незначительных количествах. Межузелковые зоны отсутствуют у новорожденных животных (Abe К. and Ito Т., 1977; Шахламов В.А. и Гайдар Ю.А., 1984). Так, по П.В. Пугачу (1990), дифференцировка паренхимы лимфоидных бляшек у крыс на зоны: купол, корона, герминативный центр и Т-зона происходит на 15-21 сутки постнатального онтогенеза.
В постнатальном онтогенезе новорожденных поросят солитарные лимфоидные узелки в стенке двенадцатиперстной кишки располагаются л диффузно, их количество на 1 см достигало до 0,5±0,3. Площадь Л лимфоидного узелка - 0,01 см . Количество одиночных лимфоидных узелков в стенке двенадцатиперстной кишки остается постоянным до шестимесячного возраста, их количество возрастает в 2 раза к году (Панфилов А.Б., 1991).
По исследованиям S. Mishara (1999), в тощей кишке однодневных поросят обнаруживается 20 лимфоидных бляшек, их количество увеличивается с возрастом до 24. Размеры лимфоидных бляшек новорожденных животных колеблются от 0,3 см2 до 1,2 см2. Количество лимфоидных узелков в бляшках составило от 16 до 195. (Петренкова С.В., 2006). Длина полосовидной бляшки подвздошной кишки однодневных поросят - 45,5 см, у взрослых особей увеличивается до 198 см (Binns R.M. and Licence S.T., 1985; Pabst R. and Binns R.M., 1989; Binns R.M., Pabst R., 1994; Mishara S., 1999; Панфилов А.Б., 1987-2009).
В стенке слепой кишки поросят в возрасте одного месяца солитарные узелки располагаются диффузно. Большая их плотность 2,0±0,5 на 1 см2 в верхушечной части, где их размеры составляли 0,1 см2; к трехмесячному возрасту плотность на 1 см возрастает до 4,6±0,6 лимфоидных узелков. В стенке ободочной кишки величина одиночных лимфоидных узелков в пределах одного миллиметра, а локализовались они преимущественно ближе к антимезентериальному краю; к трехмесячному возрасту размеры узелков изменяются незначительно - из 288 узелков лишь 40 имели величину 0,1-0,2 гу см . В стенке прямой кишки плотность одиночных лимфоидных узелков
5,4±0,7 на 1 см2, а к трехмесячному возрасту плотность узелков составляет
9,1±1,0 см2 (Панфилов А.Б., 1987-2009). Распределение пейеровых бляшек вдоль тонкой кишки, их размеры и число заметно отличаются между разными видами животных (Pabst R. et al., 1988; Rothkotter H. J. et al., 1989;
Landsverk T. et al., 1991; Mishara S., 1999). У кабанов - сеголетков в стенке слепой кишки обнаруживаются одиночные лимфоидные узелки. Размер
2 2 овальных лимфоидных узелков колеблется от 0,0025 см до 0,01 см . В стенке ободочной кишки выявлены одиночные лимфоидные узелки, лимфогландулярные комплексы, лимфоидные бляшки. Лимфогландулярные комплексы — крипты, окруженные одиночными лимфоидными узелками.
Размеры лимфогландулярных комплексов от 0,01 см до 0,16 см , а плотность их на 1 см2 составляет 7,07±0,9. Здесь же, в собственной пластинке, плотность овальных солитарных лимфоидных узелков на 1 см2 - 113,0±6,02.
В слизистой оболочке прямой кишки кабанов-сеголетков обнаруживаются одиночные лимфоидные узелки и лимфогландулярные комплексы.
Одиночные, округлые, лимфоидные узелки распределены хаотично.
Плотность их на 1 см - 1,80±0,36. Размер одиночных лимфоидных узелков
2 2 варьируется от 0,0006 см до 0,003 см , а лимфогландулярных комплексов от
0,04 см" до 0,06 см . Количество одиночных лимфоидных узелков, формирующих лимфогландулярный комплекс - 5-25, в среднем - 13,4±7,06 (Панфилов А.Б. с соавт., 2000-2005).
У самца вуалевого песца в стенке тонкой кишки Н.А. Сунцова (1997, 2005) описывает одиночные и сгруппированные лимфоидные узелки. В стенке слепой кишки одиночные лимфоидные узелки, как правило, овальные, всего их насчитывается 58,5±3,74. В стенке ободочной кишки одиночные лимфоидные узелки самые мелкие по размеру - от 0,0025 см2, редко до 0,04 см , а в прямой их - 96,88±7,76. Морфология лимфоидной ткани у домашней кошки описана у О.Б. Ждановой с соавт., (2005). Так, у кошек, при переходе пилорической части желудка в двенадцатиперстную кишку, выявлено желудочно-двенадцатиперстное лимфоидное кольцо. В стенке тощей кишки встречались как одиночные, так и сгруппированные лимфоидные узелки. Площадь овальных одиночных лимфоидных узелков на 1 см2 - 0,15±0,035. Число лимфоидных бляшек - 4,16±0,31. В подвздошной кишке располагаются как одиночные лимфоидные узелки, так и лимфоидные бляшки, в составе которых имеется и полосовидная бляшка.
У белых крыс П.В. Пугач (1990) выявил пейеровы бляшки в тонкой кишке. Их количество увеличивается до четырехнедельного возраста и равно 14,5. Одиночные лимфоидные узелки у белой крысы составляют в стенках слепой кишки - 13, ободочной - 33, в прямой - 49. Кроме этого, в стенке прямой кишки залегает крупная лимфоидная бляшка, состоящая из 19-28 узелков, размер ее 0,560 х 2,310 мм (Костицын А.С., 1988; Трясучев П.М., 1997; Перфилова Е. А., 2006-2008).
У человека количество одиночных лимфоидных узелков в стенке кишечника с момента рождения до периода первого детства возрастает, а с восьми лет и до старости - снижается, причем в тонкой кишке в большой степени (Cornes I.S., 1965; Батуев К.М., 1967, 1971; Сапин М.Р., 1983; Хатамов Э.А., 1983, 1985, 1986, 1988; Bienenstock I. and Befus D., 1984; Григоренко Д.Е., 2002). Наибольшую суммарную площадь - 72 см2 пейеровы бляшки занимают у подростков (Сапин М.Р., 1989). В червеобразном отростке у человека до 16 лет количество и размер лимфоидных образований возрастает (Глейберман С.Е., 1962; Рязанцев В.Н., 1970; Батуев К.М., 1976; Щербаков В.В., 1980; Афанасьев Ю. И. и соавт., 1983; Сакимбаев Э.Р., 1983, 1984). Лимфоидный аппарат прямой кишки человека представлен как диффузной лимфоидной тканью, так и лимфоидными узелками (Шестаков A.M., Сапин М.Р., 2005).
Лимфатические узлы представляют скопления лимфоидной ткани по ходу лимфатических сосудов (Вершигора А.Е., 1975).
Этих образований насчитывается у свиньи - 190, у крупного рогатого скота - 300, овцы - 115, собаки - 90, лошади - 8000, человека - 500-700. Длина их от булавочной головки до 20 и более сантиметров. Лимфатические узлы бывают округлой (крыса, мышь, свинья, крупный рогатый скот, кролик, овца), овальной (собака, кошка, овца), бобовидной (крупный рогатый скот, кролик, овца), лентовидной (свинья, овца), подковообразной (крупный рогатый скот), гроздевидной (лошадь) форм (Сапин М.Р., 1978, 1996; Вылков И.Н., 1980; Трясучев П.М., 1983; Панфилов А.Б., 1991, 2002; Гугенмейер Н.Р., 1997; Андрусяк Т.В., 2000; Безрук Е.Л., 2003; Петренкова С.В., 2006; Blaschke V. et al., 1995).
В двенадцатиперстной кишке суточных телят имеется от 5 до 9 лимфатических узлов, к трем месяцам их количество достигает 11.
Лимфатические узлы тощей кишки мононодозные и полинодозные, расположёны в два ряда. Общее количество в двух рядах у суточного теленка составляет от 30 до 36, к трехмесячному возрасту их число снижается до 26.
Число подвздошных лимфатических узлов у телят в возрасте одного месяца варьируется от 3 до 5, к трем месяцам - от 5 до 8. В брыжейке слепой кишки — 3-7 лимфатических узлов, узлы лежат в подвздошнослепоободочной связке. Число лимфатических узлов ободочной и прямой кишках варьируется от 31 до 42 и от 17 до 22 соответственно, а к трем месяцам их количество увеличивается до 59 в ободочной и до 23 в прямой (Панфилов А.Б., 2002; Видякина М.А., 2003, 2004, 2005).
Количество лимфатических узлов прямой кишки у новорожденных овец - 6-8, у особей трех с половиной - четырехмесячного возрастов - 5-7 и к двум - пяти годам их количество снижается до 3-5 (Голомако Е.Г., 1999; Чумаков В.Ю., с соавт., 2004,2005; Ливенцева Н.Н., 2007).
Количество лимфатических узлов ампулы двенадцатиперстной кишки нутрий равно двум, в брыжейке тощей кишки варьируется от 6 до 18, в ободочной находится 2 узла, в прямой кишке у большинства нутрий имеется один лимфатический узел (Сунцова Н.А., 1999; Панфилов А.Б., 2002; Киселева Ю.А., 2006).
Исследованиями З.А. Махмудова (1981) установлено, что у человека верхние брыжеечные лимфатические узлы, находящиеся в брыжейке тонкой кишки, группируются в виде трех неправильной формы рядов, идущих почти параллельно- брыжеечному краю тонкой кишки. Количество верхних брыжеечных лимфатических узлов у взрослых людей колеблется от 66 до 404 (в 11,5% случаев - 100-250).
G.M Jossifov (1930) находил в брыжейке тонкой кишки человека 180-200 узлов, от 40 - 60 узлов у плодов, 80-90 узлов у новорожденных и до 120-140 лимфатических узлов у взрослых людей.
Периферическая группа верхних брыжеечных лимфатических узлов встречается в 97,5% случаев в количестве от 11 до 280 (в 64% случаев - 3886). Количество лимфатических узлов данной группы значительно уменьшается в пожилом возрасте. Средняя группа верхних брыжеечных лимфатических узлов является постоянной. Количество ее узлов колеблется от 40 до 171 (в 68% случаев - 60 - 100).
Количество лимфатических узлов центральной группы варьируется от 5 до 36 (69% -10-28) (Сапин М.Р., Борзяк Э.И., 1982)
В эмбриогенезе лимфатические узлы возникают в конце второго -начале третьего месяца развития. Они образуются в результате накопления мезенхимных клеток вокруг кровеносных сосудов. Наружный слой мезенхимы дифференцируется в соединительнотканную капсулу, от которой внутрь узла отходят трабекулы — перегородки. Капсула и трабекулы образуют грубый коллагеновый каркас лимфатического узла (Вылков И.Н., 1980).
Также эту закономерность отмечают в мезентериальных лимфатических узлах (Оленева Е.Н. и др., 1971; Бородин Ю.И. и соавт., 1992; Андреева С.Д., 2007). У травоядных животных лимфатические узлы имеют уплощенную капсулу, хорошо выраженный трабекулярный остов и обширные синусы. У плотоядных и всеядных плотная соединительнотканная капсула брыжеечных узлов представлена тонкими ретикулиновыми, коллагеновыми и эластическими волокнами. Трабекулярный остов в лимфатических узлах значительно развит в пределах коркового и мозгового вещества (Панфилов А.Б., 1996-2002).
Непосредственно под капсулой находится краевой синус, куда поступает лимфа по афферентным (приносящим) лимфатическим сосудам. Из краевого синуса лимфа поступает в промежуточные синусы, пронизывающие всю толщу лимфатического узла и собирается в эфферентном (выносящем) лимфатическом сосуде, который, в конце концов, выносит ее в грудной проток. Место выхода сосуда называют воротами узла. Через ворота в узел проходят кровеносные сосуды (Галактионов В.Г., 2005; Чумаков В.Ю., 2008).
Т. Hellman (1930) отметил, что у различных видов животных степень развития капсулы неодинакова - в частности, у грызунов она развита очень слабо.
Трабекулы делят лимфоузел на сегменты. В каждом сегменте выделяют три зоны: корковую, паракортикальную и мозговую (Van Rees Е. et al., 1985 Belz G., Heath Т., 1995).
Различают корковый слой, расположенный по периферии и организованный в первичные и вторичные лимфоидные узелки, причем последние содержат герминативный центр, окруженный короной, паракортикальную (тимусзависимую) зону и мозговое вещество с мозговыми тяжами (Галактионов В.Г., 2005; Смирнова Т.С., 1987).
Мозговое вещество брыжеечных лимфатических узлов свиней представлено, в основном, ретикулярными клетками и пучками коллагеновых волокон.
Особенностью лимфатического узла свиньи является его сегментарное строение, он состоит из "нодулярных единиц" (Hoshi N,. 1985).
Морфологически и функционально лимфатический узел делится на несколько составных, которые авторы назвали "компартмент". Причем все структуры компартмента концентрируются вокруг округлых образований, расположенных в области паракортекса (глубокой коры). Этим структурам присвоено название "единицы глубокой коры" — ЕГК. К ЕГК приурочены образования-коры и подлежащее мозговое вещество, что в совокупности и формирует структурно-функциональную единицу лимфатического узла — компартмент (Горышина Е.Н., Чага О.Ю., 1990; Выренков Ю.Е., с соавт., 1995).
Под капсулой располагается корковое вещество лимфатического узла, тимуснезависимая зона, содержащая преимущественно В-лимфоциты. Для коркового слоя характерна компактная укладка многочисленных малых лимфоцитов-в лимфоидные узелки, где происходит антителообразование. В ходе иммунного ответа первичные фолликулы значительно увеличиваются в размере за счет пролиферации клеток, при этом образуется зародышевый центр или центр размножения (Кульберг А .Я., 1985; Коляков Я.Е., 1986). Развитие зародышевых центов происходит только под влиянием антигенной стимуляции. При прекращении поступления антигенов с лимфой размеры их уменьшаются и через 15 недель они исчезают (Hoshi Н. et al., 1981; Сапин М.Р., 1987; Выренков Ю.Е. и соавт., 1995; Crivellato Е., Mallardi F., 1997).
В герминативных центрах в основном концентрируются В-лимфоциты (Павлова И.Г., 1978). Т.Д. Пожарисская и соавт. (1975) утверждают, что преобладающим типом клеток в центрах размножения являются большие лимфоциты, а в участках коры, окружающих центры - малые. В-клетки с иммуноглобулинами IgM и IgG встречаются, в основном, в краевой зоне и лимфоидных узелках (Denecke R. et al., 1985; Медуницин Н.В. и соавт., 1980). Клетки с комплементпозитивными рецепторами обнаружены в герминативных центрах и краевой зоне; лимфоциты с Fc-IgM-рецепторами, напротив, выявлены в лимфоцитах периферической зоны лимфоидных узелков. Mai G. et al. (1988) полагают, что только после формирования узелков начинается интенсивная миграция IgM-положительных клеток. За корковым веществом лимфатического узла следует паракортикальная зона, образованная диффузной лимфоидной тканью. Эта зона относится к тимусзависимой и заполнена Т-лимфоцитами, которые принадлежат к рециркулирующему фонду клеток. Причисление паракортикальной зоны к тимусзависимой связано с тем, что после удаления вилочковой железы паракортикальная зоны атрофируется, а при клеточном типе иммунного ответа эта зона значительно увеличивается, что свидетельствует об участии именно паракортикальной зоны лимфоузла в функционировании Т-системы иммунитета (Петров Р.В., 1982).
Т.С. Смирнова (1987) в паракортикальной зоне (глубокой коре) выделяет центр и периферию. Они отличаются друг от друга морфологическими свойствами. В центре почти нет ретикулярных волокон, тогда как на периферии они в виде плотной сети. Обе зоны содержат, главным образом, малые лимфоциты.
В паракортикальной зоне располагаются особые разновидности макрофагов, • интердигитальные клетки, обладающие уникальными морфологическими особенностями стромальных элементов, с многочисленными сплетающимися пальцевидными отростками. Считается, что с помощью гликопротеидов эти клетки индуцируют пролиферацию и дифференциацию Т-лимфоцитов в эффекторные клетки клеточного иммунитета (Пол У., 1987).
Мозговое вещество лимфатического узла состоит из комплекса структурных образований лимфоидной ткани и мозговых тяжей -лентовидных, анастомозирующих образований, расположенных по ходу мелких кровеносных сосудов. Форма тяжей определяется и поддерживается сплетениями ретикулярных волокон (Александровская О.В. и соавт., 1987).
В структуре мозгового вещества на долю мякотных тяжей приходится около половины объема (Гегин И.Т., Сизов М.Г., 1983). В мякотных тяжах, в основном, находятся В-лимфоциты и плазматические клетки. В мозговом веществе имеется большое количество мозговых синусов, находящихся между мякотными тяжами. Полость синуса выстлана береговыми ретикулярными клетками, а в просвете синусов находятся макрофаги, которые фагоцитируют антиген из лифы и могут мигрировать с ними в герминативные центры (Хлыстова З.С., 1987; Горышина Е.Н., Чага О.Ю., 1990). В постнатальном онтогенезе поросят крупной белой породы в брыжеечных лимфатических узлах тощей кишки были выявлены следующие виды клеток: лимфоциты (от 88±4,8 до 93±2,4), ретикулярные клетки (от 2,0±2,4 до 6,0±2,4), незрелые плазматические клетки (от 1,0±2,4 до 2,0±2,4), плазмабласты (от 2,0±2,4 до 11,0±4,8), иммунобласты и митозы (1,0±2,4), макрофаги (2,0±2,4).
Иммуно-цитохимические исследования показали, что клетки, дающие положительную реакцию на щелочную фосфатазу, являются В-лимфоцитами. В-лимфоциты распределены диффузно в коре, межузелковой зоне, а также небольшими группами в мозговых тяжах. Лимфоциты с активностью кислой фосфотазы — Т-лимфоциты — преимущественно встречаются по периферии лимфоидных узелков, а единичные Т-клетки имеются и в центре их. На тимусзависимой территории лимфатического узла расположены, в основном, Т-лимфоциты, но в этой же зоне выявляются небольшое количество В-лимфоцитов, 4 локализующихся около посткапиллярных венул и в местах перехода глубокой коры в мозговое вещество (Панфилов А.Б., 1991). У крупного рогатого скота основными клетками во всех морфофункциональных зонах узла являются малые лимфоциты. Их число варьируется по зонам от 57,0% до 96,34%. Наибольшая плотность лимфоцитов на единицу площади в паракортикальной зоне узлов тонкой и ободочной кишок.
Наибольшее количество иммунобластов встречается в герминативных центрах. Количество ретикулярных клеток коры равно 8,0% и до 20,0% в мозговом веществе лимфатических узлов тонкой кишки. Митотически делящиеся клетки обнаруживаются чаще в мезентериальных лимфатических узлах тонкой кишки (Видякина М.А., 2002, 2003). По Э.А Бадриевой (1979), корковое вещество брыжеечных лимфатических узлов у крыс занимает большую площадь, чем мозговое. В нем расположено множество четко выраженных узелков, в основном, со светлыми центрами. Светлые центры содержат бласты и большие лимфоциты. Выявлено высокое содержание плазматических клеток (в основном, в мякотных тяжах). Исследуя брыжеечные лимфатические узлы байкальской нерпы, И.А. Кутырев (2004) указывает, что в светлом центре лимфоидного узелка преобладают средние и малые лимфоциты (36,1% и 22,3% соответственно). Большую часть занимают малодифференцированные формы клеток - большие лимфоциты и бласты. Имеется небольшое количество плазматических и митотически делящихся клеток. Ретикулярные клетки - до 9,1%. Встречаются макрофаги и митотически делящиеся клетки.
Для брыжеечных узлов человека характерно большое число средних лимфоцитов и понижение числа малых лимфоцитов, так что их количество практически- уравнивается. Число плазматических клеток в этих узлах составляет соответственно 0,9%, а макрофагов - в среднем 1% (Сапин М.Р., Этинген JI.E., 1996).
Клеточный состав лимфатических узлов неоднороден по отношению к лимфоидным органам в силу сложных внутри- и межсистемных связей. Он поэтому постоянно подвижен, а в узлах все время происходит "анализ" клеточного содержимого. Указанные процессы обусловливают течение иммунологических реакций, быстрый обмен иммунологической информацией. Каждый структурный компонент узла имеет определенный набор клеточных элементов (Бородин Ю.И., Сапин М.Р., Этинген JT.E и соавт., 1992; Ляшко О.Г., 1986; Не V.C. et al. 1988).
Основу органа составляет ретикулярная ткань, в тяжах которой расположены форменные элементы крови, главным образом, лимфоциты на различных стадиях развития и функционирования, клетки ретикулярной ткани, образующие посредством десмоса единый синцитий (Воронин Е.С., Петров A.M., Серых М.М., Девришов Д.А., 2002).
В международной морфологической номенклатуре принято деление лимфоцитов на большие, средние и малые (Пожарисская Т.Д. и соавт., 1975; Морозова В.Т., 1997; Соболева Т.Н., Владимирская Е.Б., 2004). В лимфоидных органах крыс (Сапин М.Р. и соавт., 1996) к малым лимфацитам относятся клетки с мелким (до 3,0 мкм) круглым ядром, с хорошо выраженной ядерной мембраной. Хроматин представлен крупными полигональными глыбками без определенной ориентации. К средним лимфоцитам принадлежат клетки с круглым или слегка овальным ядром, с хорошо выраженной ядерной мембраной. Диаметр ядра - 3,2-3,8 мкм. Ядрышко в большинстве случаев заметно. Средние лимфоциты имеют больше цитоплазмы. К большим лимфоцитам относят клетки с крупным овальным (бобовидным) ядром, с тонкой нежной ядерной мембраной. Мелкие глыбки хроматина диффузно расположены в кариоплазме, более крупные имеют тенденцию располагаться ближе к ядерной мембране. Ядрышко хорошо заметно. Большие лимфоциты имеют довольно значительное количество цитоплазмы. Предшественниками лимфоцитов являются бластные формы клеток (лимфобласты). Число этих клеток изменяется в зависимости от антигенной ситуации (Асеева Н.Д., Сахарова Н.Г., 1980; Сапин М.Р., 1996). Ретикулярная ткань построена из клеток, связанных между собой отростками и межклеточного вещества, характерными элементами которого являются ретикулярные волокна, тесно связанные с клетками. Ретикулярные клетки имеют отростчатую форму, содержат крупное светлое ядро. Некоторые из них способны освобождаться от связи с другими клетками и превращаться в свободные фагоциты (макрофаги), особенно при патологических состояниях (Severy В. et al., 1984). Ретикулярные клетки делятся на несколько типов, которые характерны для различных функциональных зон лимфатических узлов. В светлых центрах (В-зона) лимфатических узлов человека описаны дендритные ретикулярные клетки (Lennert К., Niedorf Н., 1969; Mori J., Lennert К., 1969; Морозова В.Т., 1997).
Субмикроскопическое строение дендритных ретикулярных клеток впервые описали S. Milanesi (1965) и D.S. Swartzendruber (1965). По данным М.Р. Сапина (1996), для этих клеток характерны очень длинные цитоплазматические отростки, которые контактируют друг с другом с помощью десмосом. Ядра этих клеток содержат более грубый хроматин, чем ядра макрофагов, имеют одно умеренно-базофильное ядрышко. Для фагоцитирующих ретикулярных клеток характерно светлое, как правило, округлой формы ядро, в центре которого расположено одно ядрышко.
В паракортикальной зоне (Т-зона) лимфатических узлов у кроликов (Veldman D., 1978) и человека (Kaiserling Е., Lennert К., 1974) описан другой тип ретикулярных клеток. Эти клетки D. Veldman (1978) назвал «интердигитирующими» ретикулярными клетками в связи с наличием у них длинных пальцевидных отростков. Ядро в этих клетках полиморфное, неправильной формы, хроматин расположен в маргинальной зоне, мембраны гранулярной и агранулярной цитоплазматической сети цистерн не образуют.
Плазматические клетки постоянно встречаются в лимфоидных узелках как со светлыми центрами, так и без них. Но основной зоной, где локализуются плазматические клетки, являются мякотные тяжи (Трясучев П.М., 1997). Предшественниками плазматических клеток являются крупные базофильные клетки-плазмобласты. Плазматические клетки являются основными продуцентами антител (Морозова В.Н., 1997). При первичной реакции на антиген образуются иммуноглобулин М (Ig М), а так же 19S-иммуноглобулин. Предшественником плазмобластов в этом случае являются В1-лимфоциты, несущие на поверхности иммуноглобулин М, способный реагировать с антигеном. При вторичных реакциях на антиген плазматические клетки образуются из В2-лимфоцитов (клетки памяти) светлых центров. Эти плазматические клетки вырабатывают, как правило, 78-иммуноглобулин. Плазматические клетки имеют яйцевидную форму, размер их - 10-12 мкм. Ядро округлой формы, эксцентрично расположено в клетке, хроматин концентрирован по периферии ядра. Цитоплазма заполнена хорошо развитой концентрически зернистой цитоплазматической сетью, мембраны которой иногда образуют цистерны, заполненные аморфным содержимым различной электронной плотности, который и является иммуноглобулином. Митохондрии крупные, округлой формы. Иногда встречаются лизосомы умеренной электронной плотности (Фриденштейн А .Я., 1966).
Также в лимфатических узлах человека и животных всегда содержатся макрофаги. Одна из важнейших функций макрофагов состоит в фагоцитировании ненужных или инородных макромолекул и частиц (Nagata Н., et al., 2000). Макрофаги способны также «заглатывать» и разрушать патогенные бактерии, таким образом, участвуя в воспалительной реакции. К системе макрофагов относятся фагоцитирующие ретикулярные клетки, являющиеся специфичными для лимфатических фолликулов, особенно для их светлых центров (Mori У., Lennert К., 1969; Nosal G. et al.,1964; Nagata H., 2000). В поверхностном аппарате макрофаги содержат микрофиломенты, обеспечивающие подвижность плазмолеммы и образование различных внешних приспособлений (микроворсинок, выступов, псевдоподий), облегчающих захватывание и поглощение различных частиц и макромолекулярных веществ. Одним из основных ультраструктурных признаков макрофагов является наличие в их цитоплазме многочисленных лизосом и фагосом (Guy-Grand D. et al., 1974; Olah I. et al., 1975; Pabst R.M., 1984; Петров P.B., 1987; Jarry A. et al., 1988,1989; Кузник Б.И. и др., 1989; Аруин Л.И. и др., 1992, 1993; Соколова И.Л., 2001).
Фибробласты — это основные клетки, принимающие непосредственное участие в формировании межклеточных структур. Фибробласты являются крупными отростчатыми клетками, содержащими светлое овальное ядро с 12 ядрышками и значительным объемом слабобазофильной цитоплазмы. Электронно-микроскопически в цитоплазме фибробласта видны все органеллы - развитая гранулярная эндоплазматическая сеть, состоящая из удлиненных цистерн с прикрепленными полисомами больших размеров; хорошо выражены элементы аппарата Гольджи, много митохондрий, имеются лизосомы. В переферической зоне цитоплазмы расположены микрофиламенты из актина и миозина, при активности которых обеспечивается образование на внешней поверхности клетки выступов и движение фибробласта (Александровская О.В. и соав., 1987; Быков В.Л.,
1998; Козлов Н.А., 2004; Галактионов В.Г., 2005; Джеральд М.Ф., Деннис Шилдс, 2006).
Перициты входят в состав стенки мелких кровеносных сосудов — артериол, венул, капилляров и окружены собственной базальной мембраной. Снаружи от базальной мембраны располагаются адвентициальные клетки, содержащие, также как и перициты, овальное ядро, богатое глыбками гетерохроматина и имеющие цитоплазму с немногочисленными органеллами. На внутренней поверхности плазмолеммы перицита, на стороне, обращенной наружу от сосуда, содержатся многочисленные пиноцитозные пузырьки. На стороне, прилежащей к стенке сосуда, таких пузырьков значительно меньше. Предполагают, что перициты участвуют в транспорте мелкомолекулярных веществ через стенку сосуда.
Тканевые базофилы (тучные клетки) по форме, чаще всего, шаровидные или овальные, с диаметром по длине овала до 20-22 мкм. На поверхности клетки имеются короткие отростки, ядро, как правило, расположено в центре клетки. В цитоплазме содержатся митохондрии, компоненты комплекса Гольджи, короткие цистерны гранулярной эндоплазматической сети. Однако основной объем цитоплазмы клетки заполнен многочисленными крупными вакуолями и гранулами, окруженными мембраной (Джеральд М.Ф., Деннис Шилдс, 2006).
Жировые клетки (липоциты) рыхлой соеденительной ткани специализированы на синтезе и накапливании в цитоплазме нейтральных жиров (триглициридов) и утилизации их в соответствии с энергетическими потребностями организма. Различают жировую ткань белую и бурую. Структурной единицей белой жировой ткани являются крупные (до 120 мкм в диаметре) жировые клетки, имеющие шаровидную форму. Преобладающая часть объема клетки занята одной крупной каплей жира; овальное ядро клетки и околоядерная цитоплазма с некоторыми органеллами находится на периферии клетки. При электронной микроскопии в околоядерной цитоплазме обнаруживаются преимущественно мелкие овальные митохондрии, другие органеллы выражены слабее — можно встретить отдельные мелкие канальцы гранулярной эндоплазматической сети, компоненты Гольджи, а также включения гликогена.
Клетки бурой жировой ткани относительно мелкие (20-30 мкм). В сравнении с клетками белой жировой ткани, для клеток бурой жировой ткани характерны центрально расположеное ядро и наличие в цитоплазме мелких жировых капель. Бурый цвет этой ткани придают содержащиеся в митохондриях окрашенные белки - цитохромы. Пигментые клетки (пигментоциты), как правило, имеют отросчатую форму и содержат в цитоплазме большое количество темно-коричневых или черных гранул пигмента из группы меланинов (Александровская О.В. и соав., 1987; Быков В.Л., 1998; Козлов Н.А., 2004).
Порода дюрок выведена в США в 1860 году в результате скрещивания двух местных пород красной масти. В 1976 году свиньи завезены в Запорожскую область. Порода ландрас выведена в Дании в начале 20 века в результате скрещивания местных улучшенных вислоухих свиней с английскими породами - главным образом, с крупной белой, а также разведением помесей «в себе».
В общедоступной анализируемой литературе довольно подробно изучена синтопия и морфогенез лимфоидной ткани в стенках кишечника домашних и диких животных, однако нам не встретились данные по морфологии лимфоидной ткани кишечника у свиней пород ландрас и дюрок.